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熒光定量PCR實驗代測主要步驟!
更新時間:2019-10-12   點擊次數(shù):1742次

熒光定量PCR實驗代測主要步驟!


南京信帆生物技術(shù)有限公司提供實驗室代測服務(wù),包括放免實驗代做,免疫組化,PCR,WB實驗代測等到,的設(shè)備加上技術(shù)嫻熟的實驗操作人員,讓您的每一份實驗結(jié)果均真實可靠,咨詢!PCR技術(shù)服務(wù),Q-,RT-PCR實驗代做。


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PCR實驗代測,熒光定量PCR代測服實驗室試劑的操作:


1)所用的所有溶液都應(yīng)該沒有核酸和(或)核酸酶(DNase和RNase)污染。

2)所有PCR試劑中使用的水都應(yīng)該是高質(zhì)量的-新鮮蒸餾的去離子水,用0.22μm過濾的,并且是高壓滅菌。

3)在20℃到25℃貯存的試劑建議加點像疊氮鈉一類的抗微生物劑,在擴增試劑或樣品制備試劑中加入0.025%的疊氮鈉不抑制擴增反應(yīng)。

4)所用試劑都應(yīng)該以大體積配制,實驗一下看試劑是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量進行貯存。

5)所有試劑和樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的瓶子和管子。

6)新配制的試劑在用于準備新的標(biāo)本之前應(yīng)該加以檢驗。

7)樣品準備和前PCR區(qū)所使用的移液管在不使用時都應(yīng)該小心保存。

Real -Time PCR,即實時監(jiān)測PCR擴增產(chǎn)物并進行解析的方法,它是在PCR反應(yīng)體系中加入熒光物質(zhì),并通過Real -Time PCR檢測系統(tǒng)對PCR反應(yīng)進程中的熒光信號強度進行實時監(jiān)測,zui終對實驗數(shù)據(jù)進行分析處理的方法。Real -Time PCR自1996年由美國Applied Biosystems公司推出以來,廣泛應(yīng)用于生物研究的各個領(lǐng)域。目前主要有SYBR Green 染料、Taqman探針法兩種。

 


PCR實驗代測,熒光定量PCR代測服主要儀器及耗材:


旋渦振蕩器 :上海青浦瀘西儀器廠產(chǎn)品

手握式電動勻漿機:德國FLUKO 公司產(chǎn)品

低溫冷凍離心機:Sigma(3K15)公司產(chǎn)品

Real-time檢測儀:ABI (ABI-7300)公司產(chǎn)品

超純水分離系統(tǒng):美國LABCONCO公司

離心管及10μL、200μL、1000μL槍頭等常規(guī)耗材均為國產(chǎn);RNA提取過程中所需的離心管、槍頭等耗材經(jīng)過0.1%的DEPC水浸泡過夜,121℃滅菌30min,烘干后備用。

 

熒光定量PCR實驗代測主要步驟!

 

 

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